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上海通蔚生物關(guān)于完全培養(yǎng)基這幾點(diǎn)一定要注意了
日期:2024-08-26 10:32
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摘要:細(xì)胞培養(yǎng)目的與用途
1、科學(xué)研究
(1)**研究開發(fā),如新藥篩選,疫苗、基因工程**、細(xì)胞工程**研究與開發(fā)、單克隆抗體制備等。
(2)基礎(chǔ)研究,如**作用機(jī)理、基因功能、**發(fā)生機(jī)理等研究。
2、生物制藥
(1)疫苗生產(chǎn):如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等),多肽疫苗(腫瘤疫苗)等。
(2)基因工程**生產(chǎn):如EPO等。
(3)抗體**、基因****生產(chǎn)。
(4)細(xì)胞工程**生產(chǎn):生物細(xì)胞內(nèi)的些生物活性多肽,生物活性物質(zhì)等。
(5)利用細(xì)胞法體外測(cè)定生物活性物質(zhì)的活性;并預(yù)測(cè)其在體內(nèi)的藥效和替代體內(nèi)法檢測(cè)其成品的生物活性。
一場(chǎng)場(chǎng)秋雨涼了七月的聒噪一陣陣涼風(fēng)透了七月的浮華浮世清歡,細(xì)水長(zhǎng)流秋高氣爽,金菊八月就讓涼風(fēng)帶走了你難過的曾經(jīng),也請(qǐng)?zhí)焖{(lán)安慰了你不安的現(xiàn)在。
完全培養(yǎng)基技術(shù)又叫細(xì)胞克隆技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指的是細(xì)胞在體外條件下的生長(zhǎng),在培養(yǎng)的過程中細(xì)胞不再形成組織(動(dòng)物),天的文章中跟大家介紹些關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識(shí)!
完全培養(yǎng)基的基本概念
體外培養(yǎng)(in vitro culture)包括所有結(jié)構(gòu)層次的培養(yǎng),即:組織培養(yǎng)(tissue culture)、細(xì)胞培養(yǎng)(cell culture)和器官培養(yǎng)(organ culture)。
完全培養(yǎng)基(Cell culture)指從生物機(jī)體取出部分組織分散成單個(gè)細(xì)胞或直接從機(jī)體取出單個(gè)細(xì)胞,也可把體外培養(yǎng)細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞在體外條件下培養(yǎng),細(xì)胞能繼續(xù)存活與增殖。
完全培養(yǎng)基目的與用途
1、科學(xué)研究
(1)**研究開發(fā),如新藥篩選,疫苗、基因工程**、細(xì)胞工程**研究與開發(fā)、單克隆抗體制備等。
(2)基礎(chǔ)研究,如**作用機(jī)理、基因功能、**發(fā)生機(jī)理等研究。
2、生物制藥
(1)疫苗生產(chǎn):如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等),多肽疫苗(腫瘤疫苗)等。
(2)基因工程**生產(chǎn):如EPO等。
(3)抗體**、基因****生產(chǎn)。
(4)細(xì)胞工程**生產(chǎn):生物細(xì)胞內(nèi)的些生物活性多肽,生物活性物質(zhì)等。
(5)利用細(xì)胞法體外測(cè)定生物活性物質(zhì)的活性;并預(yù)測(cè)其在體內(nèi)的藥效和替代體內(nèi)法檢測(cè)其成品的生物活性。
完全培養(yǎng)基和傳代培養(yǎng)
原代培養(yǎng)(primary culture):將動(dòng)物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機(jī)械方法處理,分散成單細(xì)胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖,這過程稱原代培養(yǎng)。
但實(shí)際上,通常把第依代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。
傳代培養(yǎng)(subculture):細(xì)胞在培養(yǎng)器皿中生長(zhǎng)定時(shí)間后,被分開接種到新的培養(yǎng)器皿中。
當(dāng)原代培養(yǎng)成功以后,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)和細(xì)胞不斷分裂,則細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制,生長(zhǎng)速度減慢甚至停止;另方面也會(huì)因營(yíng)養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長(zhǎng)或發(fā)生中毒。此時(shí)就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi),再進(jìn)行培養(yǎng)。
對(duì)單層培養(yǎng)而言,80%匯合或剛匯合的細(xì)胞是較理想的傳代階段。
體外培養(yǎng)細(xì)胞的方式
群體培養(yǎng)(mass culture),將含有定數(shù)量細(xì)胞的懸液置于培養(yǎng)瓶中,讓細(xì)胞貼壁生長(zhǎng),匯合(confluence)后形成均勻的單細(xì)胞層;
克隆培養(yǎng)(clonal culture),將高度稀釋的游離細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,各個(gè)細(xì)胞貼壁后,彼此距離較遠(yuǎn),經(jīng)過生長(zhǎng)增殖每個(gè)細(xì)胞形成個(gè)細(xì)胞集落,稱為克?。╟lone)。個(gè)細(xì)胞克隆中的所有細(xì)胞均來源于同個(gè)祖先細(xì)胞。
上海通蔚生物在實(shí)驗(yàn)中完全培養(yǎng)基底物溶液受到污染時(shí)的處理方法,若發(fā)現(xiàn)底物溶液已呈現(xiàn)淡藍(lán)色,請(qǐng)不要再使用反應(yīng)時(shí)間超過太久,請(qǐng)控制反應(yīng)時(shí)間。若是微孔中的試劑未能充分混合試劑加完后,需輕敲盤四周使其充分混合均勻洗板過程發(fā)生問題,請(qǐng)隨時(shí)監(jiān)控洗板機(jī)洗板過程,洗完后立即進(jìn)行下一步驟。